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    小鼠腹腔巨噬細(xì)胞的分離方法

    發(fā)布時(shí)間： 2024-08-02　　點(diǎn)擊次數(shù)： 621次
    　　1. C57BL/6小鼠脫頸處死。
     
    　　2. 腹部剃毛，75%酒精消毒。
     
    　　3. 用注射器吸取10mL冷的生理鹽水，提起小鼠腹中部的皮膚和腹膜，讓針頭從提取處穿刺進(jìn)入小鼠腹腔，緩緩?fù)谱⑸睇}水。
     
    　　4. 輕揉小鼠腹部數(shù)次，靜置3min，使液體在腹腔內(nèi)充分流動(dòng)。
     
    　　5. 用鑷子提起下腹皮膚，使與腹膜分開，在鑷子提取處將皮膚剪開一個(gè)小口，再撕開整個(gè)腹部皮膚，使腹膜暴露。
     
    　　6. 將注射器針頭插入縫隙處抽取腹腔液。
     
    　　7. 將腹腔液在250g下離心5分鐘。
     
    　　8. 將細(xì)胞重懸在含有10%FBS的RPMI 1640培養(yǎng)基中，并在37°C、5%CO2的培養(yǎng)箱中孵育2小時(shí)。
     
    　　9. 然后去除非貼壁細(xì)胞，用PBS洗滌，分離后立即將腹腔巨噬細(xì)胞用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。