穩(wěn)轉株篩選實驗

穩(wěn)轉株篩選實驗目的:

 穩(wěn)轉株長用于基因研究方向，便于長期觀察和檢驗基因對于細胞功能以及蛋白的相互作用。

一般轉染實驗方法：

用轉染質?；虿《厩秩镜姆椒▽嫿ê玫暮谢虻妮d體導入細胞，根據(jù)不同的基因載體中所含的抗性標志選用相應的試劑進行篩選混合陽性克隆。在陽性混合克隆的基礎上，得到單細胞長出的陽性單克隆，繼而得到穩(wěn)定轉染細胞株。

一般篩選方法：

1、轉染質粒后，單克隆方法篩選穩(wěn)定細胞系

對大多數(shù)細胞轉染效率較低。對于基因過表達，如果轉染效率達到40%，基因過表達尚可。但是對于基因干擾實驗，對轉染效率要求遠遠高于基因過表達，通常質粒轉染無法滿足。

另外，質粒游離于細胞質中，很快降解，無法滿足較長時間的檢測項目；質粒轉染整合幾率極低，穩(wěn)定細胞株構建耗時耗力，且得率很低，往往需要挑取單克隆株。

2、病毒感染篩選穩(wěn)定細胞株

病毒感染方法較質粒轉染篩選單克隆方法更方便和高效，是目前主流的穩(wěn)定細胞系篩選方法。用慢病毒制備穩(wěn)轉細胞株，由于其高效整合、高效轉錄、高效表達、宿主范圍廣，感染效率高，且與細胞染色體整合而不發(fā)生基因重排，是制備穩(wěn)定細胞株的理想載體。

服務內容：1、穩(wěn)定：15代以內細胞穩(wěn)定表達。

      2、迅速：一般控制在1個月以內完成構建。

      3、經濟：價格實惠。

      4、質量：對外源基因進行嚴格鑒定。

伊萊博生物擁有豐富的研究經驗，具備完善的系統(tǒng)化管理能力和科研服務體系。目前已自建細胞、分子、病理等實驗平臺近1000平方米，擁有的儀器設備、細胞庫、樣本保存庫等。動物實驗中心近1800平方米，可滿足同時飼養(yǎng)清潔級和SPF級動物。核心實驗技術團隊主要來自中國科學院大學、復旦大學、上海交通大學等重點高校及科研機構，能夠為客戶提供研究方案策劃、項目實施及項目深度分析等方面的技術支持。公司目前參與研究項目已經涵蓋心腦血管、腫瘤、內分泌、生殖、免疫、神經等諸多領域。